吸光度分析和熒光分析是兩種不同但互補的技術(shù)，用于檢測和定量樣品中的目標(biāo)分析物。測量特定波長的紫外光和可見光 （UV-Vis） 的吸光度是定量生物分子的成熟方法之一。同時，熒光分析長期以來一直用于測量熒光團與波長激發(fā)的樣品結(jié)合的發(fā)射光譜，以進行高度特異性的分子定量。

1. 靈敏度

吸光度和熒光分析在生命科學(xué)實驗室中通常用于測量小體積樣品。微量分光光度計能夠檢測 1 μL 樣品中低至 0.75 ng/μl 的雙鏈 DNA。使用 DeNovix 高靈敏度檢測試劑盒進行熒光分析可產(chǎn)生皮克 （pg） 級靈敏度，可實現(xiàn)低至 0.005 ng/μl 的檢測。

2. 動態(tài)范圍的差異

測量的動態(tài)范圍也是比較方法的一個考慮因素。就測量范圍的寬度而言，吸光度優(yōu)于熒光分析。以 dsDNA 為例，熒光定量試劑盒廣泛的檢測范圍可達 4000 ng/μl，而微量分光光度計中的上限目前為 37500 ng/μl。

3. 檢測要求

吸光度分光光度計直接測量樣品吸收的特定波長的量，無需稀釋或分析制備。相比之下，熒光分析需要將目標(biāo)樣品與檢測試劑盒中的熒光試劑結(jié)合。還必須將樣品與已知濃度的類似樣品進行比較。因此，在進行熒光定量分析時，有必要準(zhǔn)備和測量標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4. 污染檢測

雖然熒光的特異性有利于評估目標(biāo)分析物的濃度，但所得數(shù)據(jù)無法深入了解樣品中的任何污染。相比之下，可以通過在一系列波長范圍內(nèi)進行吸光度光譜測量來推斷出許多不同的污染物。評估 260/280 nm 和 260/230 nm 等比率可提供有價值的信息，并且可以作為樣品質(zhì)量控制制度的一部分實施。

使用 DeNovix 進行吸光度和熒光分析

DeNovix 認識到將吸光度和熒光分析結(jié)合到一個綜合設(shè)備中的好處，使科學(xué)家能夠利用每種方法的優(yōu)勢。我們的 DS-11 系列將市場上靈敏的超微量紫外-可見分光光度計與集成熒光計相結(jié)合。這提供了寬動態(tài)范圍和更高的靈敏度，以及特異性分析物定量和污染物檢測。